直接抗球蛋白試驗可以證實體內的紅血球上是否有球
蛋白附著，特別是IgG和C3d。清洗過的紅血球直接與抗
人類球蛋白試劑反應。當紅血球上有IgG附著時，DAT立
刻呈陽性反與；但如果紅血球上是附著補體或IgA時，則
需要在室溫下靜置一段時間之後，才會有反應
  陽性的情況發生於：自體免疫溶血性貧血、新生婼溶
血性疾病、對最近輸入的紅血球發生同種異族免疫反
應、和藥物所引發的溶血反應。藥物：
cephalosporins、levodopa、methadone、methydopa、
penicillin、quinidine、phenacetin。

以EDTA來作為抗凝血的物質時，通常可以避免補體常可
以避免補體成分在體外的環境下避被凝集。而如果需要
的話，也可以使用紅蓋子的試管。